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梅里埃 API20NE非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒說明書

發布時間: 2021-12-10  點擊次數: 754次

非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法)說明書 

產品名稱通用名稱:非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法) 

英文名稱:API 20 NE 

包裝規格25 測試/盒 

預期用途該產品用于非苛養、非腸道革蘭陰性桿菌的鑒定。 該產品用于鑒定非苛養、非腸道革蘭陰性桿菌(如假單胞菌屬、不動桿菌屬、黃桿菌屬、莫拉菌屬、弧菌屬 和氣單胞菌屬等)的標準鑒定系統,包括 8 個常規試驗、12 個同化試驗和 1 個數據庫。 

檢驗原理 API 20 NE 試劑條由裝有脫水底物的 20 個微型管構成。常規試驗接種重溶培養基的鹽水細菌懸液。在 培養過程中,代謝產生顏色變化,此變化可為自發或通過加入試劑顯示。同化試驗接種培養基,如果它 們能夠使用相應的底物,則細菌生長。依照讀數表讀取反應,通過參考分析曲線指標或使用鑒別軟件得到鑒 別。

主要組成成分試劑盒組成(25 種實驗) - 25 API 20 NE 試劑條 - 25 個孵育盒 - 25 安瓿 API AUX 培養基 - 25 張結果單 試劑條成分 在本說明書的判讀表中,給出了 API 20 NE 試劑條的組成。

需要但沒有提供的試劑和材料 試劑 - API NaCl 0.85 %培養基, 2 mL (Ref. 20 070) - 試劑 JAMES (Ref. 70 542) NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442)  Zn (Ref. 70 380) - 氧化酶 (Ref. 55 635*) * 參照品未在某些國家出售:采用同等試劑。 IVD非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法) 版本號 07615K - zh –2009/11 2 - 礦物油 (Ref. 70 100) 材料 - 移液管或 PSIpetter - 安瓿保護器 - 安瓿架 - 一般微生物實驗室設備 

儲存條件及有效期2~8℃儲存,有效期為 12 個月。

生產日期:詳見外包盒標簽。

有效期至:詳見外包盒標簽。 

適用儀器- 麥氏標準比濁管 (Ref. 70 900) No. 0.5 - API 20 NE 分析鑒定系統 (Ref.20 090) apiweb™鑒定軟件 (Ref.40 011) (咨詢生物梅里埃

樣本要求API 20 NE 不直接用于臨床或其他標本。 按照標準微生物學技術,必須首先在適合的培養基(如胰蛋白酶解酪蛋白)上分離要鑒定的微生物。 

檢驗方法氧化酶試驗 必須按照生產商的使用說明,進行氧化酶試驗。應當在結果單上記錄結果,因為它是最后圖譜的一個有 機部分(第 21 個鑒定試驗)。

菌落 API 20 NE 只應用于不屬于腸桿菌科的非苛養革蘭陰性桿菌。 1:有些非腸道的革蘭陰性桿菌亦為氧化酶陰性(嗜麥芽黃單胞菌、不動桿菌)。這些微生物也可以 API 20 NE 鑒定,但必須根據其它細菌學或臨床標準加以選擇。 2:對營養要求多或需要適當處理注意事項的苛養微生物(如布魯氏菌和弗朗西絲氏菌),未包含在 API  20 NE 的數據庫內。必須采用其他方法排除或證實它們的存在。

試條的準備 準備一個培養盒、盤和蓋子,向盤的底部倒入約 5mL 蒸餾水或去離子水【或任何不含添加劑或可能釋放 氣體(如氯氣、二氧化碳等)的化學物的水】,創造一種濕氣。在盤的邊緣部分記錄標本編號。(不要在蓋上 記錄編號,因為在操作期間它可能錯位。)從各個包裝中取出試劑條。將試劑條放入培養盒中。

接種物的準備 

? 按照本產品說明書警告和注意事項"段落所示,打開一安瓿 API NaCI 0.85 %培養基(2 mL),或使 用含 2 mL 不含添加劑的 0.85 %生理鹽溶液。

? 使用吸管或滴管,通過抽吸或通過連續接觸,從瓊脂糖培養基上挑取 1 - 4 個形態相同的克隆。建議 使用早期培養物(18 - 24 小時)。

? 配制混懸液至濁度等于 0.5 McFarland。此混懸液在配制后必須立即使用。 注:調整接種物密度至 0.5 McFarland 非常重要;否則 API 20 NE 試劑條試驗可能不能正確發揮功能。 特別是,較弱的接種物可能導致假陰性結果。在操作試劑條的過程中,不要接觸反應杯,接種后不要將試劑 條長時間暴露空氣。 

試條的接種非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法) 版本號 07615K - zh –2009/11 3

? 用同一根吸管將鹽水混懸液加到試驗管(不是反應杯),接種試驗 NO3PNPG。將試劑條稍前傾,將吸 管或滴管的頂部靠在杯的側面,以避免管的底部形成氣泡。 

? 按照警告和注意事項"中所示,打開 1 API AUX 培養基安瓿,向安瓿加入約 200 ? L 剩余的鹽混懸液。 用吸管混勻,避免形成氣泡。

? 用混懸液注滿由 GLU PAC 試驗管和杯。當心液面必是平的或稍凸,不能呈凹或新月形。杯子裝得不 滿或過滿可能給出不正確的結果。

? 3 個下劃線試驗(GLU、ADH URE)的杯子加礦物油,直至形成凸出的新月形。

? 蓋上培養盒,在 29°C ± 2°C 培養 24 小時(± 2 小時)。 陽性判斷值對于不同生化反應預期結果的范圍,查閱本說明書末尾的鑒別表。 檢驗結果的解釋讀取試劑條

? 孵育期后,通過參閱判讀表,判讀試劑條。 

? 在結果單上記錄所有自發反應(GLU、ADH、URE、ESC、 GEL PNPG)。

? 為保護同化反應免受空氣播散的污染,應當進行兩個試驗 NO3 TRP 的判讀。要做這一點,在 NO3 TRP 試驗判讀期間,用培養盒蓋子遮蓋同化反應。 

? NO3試驗: - 各加一滴 NIT1 NIT2 試劑至 NO3杯。 - 5 分鐘后,紅色表示陽性反應,記錄在報告單上。 - 由于氮氣的產生(表現為存在小氣泡)有可能引起陰性反應:加 2~3 mg Zn 試劑到 NO3杯中。 - 5 分鐘后,保持無色的杯子表明陽性反應,記錄在報告單上。如果杯子變為粉紅色,反應為陰性,因為管 中存在硝酸鹽,被鋅還原為亞硝酸鹽。 用于細菌鑒定的反應是硝酸鹽還原。當上述二個反應(產生 NO2N2)中的任何一個為陽性時,硝酸鹽 還原反應為陽性。 但是,N2的產生則可單獨用作補充試驗(參閱分析圖譜索引)。 

? 檢測: 1 JAMES 試劑。立即發生反應:全杯出現粉紅色表明陽性結果,記錄在結果單上。

? 同化試驗:觀察細菌生長。不透明杯子表明陽性反應。 偶爾,1 個杯子顯示為弱生長。在這種情況,通過與試劑條上的其他試驗強度比較,結果應當記錄為 或 ±。 

注意: 一旦進行了上述判讀,如解釋"段落中所示,鑒定是可能的。在下列情況,必須重新孵育: - 無區別 - 無法接受或可疑的圖譜; - 如果對獲得的圖譜標注了以下備注: 48 小時孵育前鑒定是無效的 使用習慣或滴管,通過抽吸吸走 NIT 1、NIT 2 JAMES 試劑,立即用礦物油掩蔽試驗 NO3TRP,以便形 成凸的新月形。在 29°C ± 2°C 重新孵育 24 小時,除了只應在 24 小時判讀的前 3 個試驗(NO3、TRP GLU), 其余試驗再讀一次結果。 

說明: 采用數字譜獲得鑒定。

? 測定使用率: 在結果表上,將結果分成 3 組,每組標記為編號 1、2 4。在每組內加陽性反應相應的數字,得到一個 7 位數;氧化酶反應構成第 21 個反應,如果為陽性則數值為 4。 

? 鑒定:非苛養非腸道革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法) 版本號 07615K - zh –2009/11 4 這采用數據庫(V7.0)進行 * 棒狀桿菌鑒定用編碼冊 - 查找圖譜中的數字譜。 * 采用 apiweb™鑒定軟件 - 通過鍵盤手動輸入 7 位數的數字譜。

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